Perbezaan antara RT-PCR dan qPCR

Reaksi rantai polimerase transkripsi terbalik (RT-PCR)

RT-PCR vs. Qpcr

Kemajuan dalam bioteknologi telah mengakibatkan penemuan beberapa cara untuk mengatasi tuntutan untuk pemindahan organ selama bertahun -tahun. Sebelum ini, seorang individu yang secara sukarela akan mendermakan mana-mana organ sebaik sahaja kematian kepada pesakit yang memerlukan hanya dapat memulakan operasi untuk pemindahan. Kajian dan penyelidikan berterusan ahli biologi membawa kepada penemuan sel stem.

Sel stem merujuk kepada mereka yang diambil dari DNA embrio, yang akan berfungsi sebagai sumber untuk penjanaan semula sel yang pada dasarnya akan menjadi klon organ di mana DNA telah diambil. Walaupun aktivis hak asasi manusia melobi untuk menghentikan prosedur sedemikian, operasi yang berjaya telah membuktikan keberkesanan perkembangan sel stem dalam pemindahan organ.

Sebelum seseorang dapat menghargai dan memahami sepenuhnya sel stem, bagaimanapun, ada keperluan untuk dibiasakan dengan istilah yang berbeza yang berkaitan dengan penemuan saintifik ini. Penanaman sel stem berkaitan dengan DNA dan pengekodannya. Oleh itu, penting bagi pelajar atau mana-mana individu yang berminat dalam bidang ini untuk membezakan antara RT-PCR dan qPCR.

Reaksi rantai polimerase transkripsi terbalik (RT-PCR) adalah salah satu daripada banyak varian tindak balas rantai polimerase, atau PCR. Teknik makmal ini digunakan secara meluas dalam biologi molekul agar para saintis menghasilkan pelbagai salinan urutan DNA tertentu melalui proses yang dicipta sebagai "penguatan."Perbezaan antara RT-PCR dan PCR tradisional ialah RNA pertama kali disalin ke dalam pelengkap DNAnya, yang menggunakan transkripase terbalik. DNA pelengkap baru yang mengandungi transkripsi terbalik akan dikuatkan menggunakan PCR tradisional atau PCR masa nyata.

Kebanyakan pelajar yang mempelajari proses ini sering membuat kesilapan beralih pCR transkripsi terbalik dan PCR masa nyata kerana kedua-duanya disingkat sama. Untuk mengelakkan kekeliruan, ahli biologi melabelkan PCR masa nyata sebagai PCR masa nyata kuantitatif atau qPCR.

QPCR sangat berbeza dari RT-PCR, kerana qPCR bertanggungjawab untuk mengukur amplifikasi seperti yang berlaku. Boleh dikatakan bahawa RT-PCR memulakan proses penguatan, sementara qPCR mengukurnya sebagai prosedur yang berlaku.

PCR masa nyata kuantitatif

QPCR sebenarnya telah merevolusikan kaedah pendekatan satu arah tradisional apabila ia mengukur DNA dan RNA, sebagai menggunakan kaedah qPCR membolehkan ahli biologi menentukan kepekatan awal asid nukleus sebelum keputusan tindak balas telah diperhatikan dan Jotted Down.

Aplikasi qPCR, yang kini dianggap sebagai teknik analisis yang paling kuat dan sensitif untuk kajian genetik, telah melebar dengan ketara. Ia kini terlibat dalam analisis ekspresi gen kuantitatif, genotip, pengesanan patogen, dan analisis SNP, bersama dengan pengukuran gangguan RNA.

QPCR sering digabungkan dengan proses transkripsi terbalik untuk mengukur RNA messenger dan mikroRNA yang terdapat dalam sel -sel tisu yang diperhatikan dan diuji dengan. Ini kemudian memberikan perbezaan yang lain antara kedua-dua: RT-PCR boleh digunakan untuk proses penguatan, tetapi ia perlu disatu dengan qPCR untuk tujuan kuantifikasi.

QPCR juga dikenali lebih kuantitatif kerana data dapat dikumpulkan sebagai fasa pertumbuhan eksponen (log) PCR berlangsung. Ahli biologi mencatat bahawa kuantiti hasil sampingan PCR berkadar terus dengan jumlah asid nukleik templat yang akan diukur melalui qPCR.

Sebaliknya, RT-PCR jauh dari mempunyai sifat kuantitatif sebagai pematuhan keamatan jalur yang diperkuatkan pada gel berikutan standard set kepekatan boleh menyebabkan kesimpulan "separa kuantitatif".

Ringkasan:

1.QPCR dan RT-PCR kedua-duanya digunakan dalam bioteknologi dan digunakan untuk pengeluaran pelbagai salinan DNA.
2.RT-PCR digunakan untuk menguatkan transkripsi terbalik kod DNA; QPCR mengukur penguatan.
3.RT-PCR adalah untuk penguatan, sementara qPCR adalah untuk kuantifikasi.
4.QPCR bersifat kuantitatif, sementara RT-PCR tidak.